自1956年研究人员首次在细胞培养中发现支原体污染以来,支原体污染问题无处不在。综合FDA、美国模式菌种收集中心(ATCC)等机构收到的相关数据,世界各国细胞系支原体污染的平均比例为30-60%。
如何进行安全的无支原体细胞培养?
- 技巧1:穿戴适当的个人防护设备(手套、专用的干净实验服、护目镜)并消毒手套;
- 技巧2:在细胞处理开始前以及处理不同细胞系之间擦拭安全柜中的工作桌面;
- 技巧3:避免在你的细胞上说话或打喷嚏;
- 技巧4:避免飞溅、溢出和气溶胶;
- 技巧5:为每个细胞系使用指定的培养基瓶;
- 技巧6:定期清洁培养箱,包括水盘;
- 技巧7:定期清空及清洁水浴设备;
- 技巧8:细胞复苏几天后测试新细胞培养物的支原体污染;
- 技巧9:隔离所有进入实验室的细胞培养物,直到它们经过支原体检测;
- 技巧10:不要忘记:每2周进行一次支原体的常规检测;
一般来说,新的细胞株都需要做支原体检测,细胞培养期间,建议每1-2周进行一次支原体检测以防止污染。因此,在实验室的日常研究需求中,需要一种快速、全面的检测方法以应对日常的检测需求。
二、Lonza MycoAlert™——简便易行的支原体快检Lonza MycoAlert™支原体检测试剂盒主要有两大优势:
1 操作简单;
2 检测时间短。其通过检测在支原体和其柔膜细菌中存在的乙酸激酶和氨基甲酸激酶的活性,完成支原体检测。仅需两步简单操作,20分钟即可完成检测。这两种酶在导致95%支原体污染的6个种属和大多数的柔膜细菌中均存在,但在真核细胞中不存在,此法既可保证检测的准确性,又可快速完成检测。
此外,该试剂盒的检测范围包括所有常规的支原体和甾原体,适用于实验室细胞培养环境的检测与筛选。其对设备要求低的特性适合搭配大部分可以检测luminescence模式的多功能酶标仪,且可搭配lucetta™ 2光度计进行MycoAlert™检测的特定模式和基于luciferase的相关试验检测。此外,lucetta™ 2光度计无需PC,体积小便于移动,可适用于实验室间移动检测。